qPCR(real time PCR)실.hwp

1. 자료설명


①qPCR(real time PCR) 실험방법 및 결과분석

▶추출한 mRNA로부터 cDNA합성→cDNA로 qPCR 돌려서 Ct값 측정

→Ct값으로 초기 dna양 유추→qPCR 정확성 분석 및 불순물 탐지를 위한 Melting curve analysis



②ELISA종류와 원리



PCR(polymerase chain reaction)과 Real time PCR과같은 여러가지 유전공학적 기법들에 대한 소개 및 실험과 실험원리, 실험결과 분석이 순차적으로 자세하게 기술되어 있습니다.

생명공학자들이나 생명관련 회사 연구원들, 생명,화학쪽 학부생들에게 많은 도움이 될것입니다.



2. 목차 및 본문내용


●qPCR(real time PCR)실험 결과레포트(Result Report)

A) Method and materials(방법 및 재료)

B) Result(결과)

C) Discussion(토론)

1. RNA 나노드롭 측정에 대한 A260/A280 비율 값의 평가(Evaluation on A260/A280 ratios

values  on RNA Nanodrop measurements)

2. cDNA 합성 프로토콜 차트 작성(RNA 평균 금액 ng/ul 및 cDNA에 필요한 양 200ng)(Make

a chart on cDNA synthesis protocol (RNA average amounts in ng/ul & required amount

for cDNA is 200ng)

3. 각 유전자(ACTB, EPCAM)에 대한 평균 Cq값(=Ct값), SD(표준편차) Cq값 및 delt Cq 값의

계산 및 그 의미)(Calculate average Cq, SD(standard deviation) Cq for each gene(ACTB,

EpCAM) and delt Cq value and indicate is its meaning) 

4. Melting curve analysis peak와 Fluorescence Amplification 그래프 그리기(Draw graphs

on Melting analysis peak and Fluorescence Amplification)

5. Melting curve analysis peak 그래프를 바탕으로 각 유전자의 Tm 값을 표기하고 평가

(Based on Melting analysis peak graphs, indicate Tm values for each gene and evaluate

them(good or bad? and why?)

6. NTC(No template control)에서 형광증폭신호를 보였다면 이 현상의 이유 추론 및 해결책

탐색(NTC showed fluorescence amplification signals....what could be possible reasons

behind this phenomenon? and any solutions?)

7. CCD18Co와 HT29의 각 유전자에 대한 Cq 값에 대한 정보가 제공될 경우, 그의 델타-델타

Cq 값의 계산 및 그 의미 추론(Information on Cq values for each gene from CCD18Co

and HT29 is provided. Calculate delta-delta Cq value and indicate its meaning)



●예비레포트(Preliminary Report)

1) BCA assay의 간단한 원리와 ELISA에 앞서 BCA assay를 하는 이유

1) Protein assay의 종류 및 원리

(1) Lowry method

(2) BCA (Bicinchoninic Acid Assay)

2) ELISA 종류별 원리, 목적,장, 단점

Direct ELISA:

Indirect ELISA:

Sandwich ELISA:

Competitive inhibition ELISA:



D)Reference
번호 제목 날짜
7468 White의 유체역학 8판(Frank M. White)1~6장 2019.07.25
7467 최신기계진동학 4판 Daniel J. Inman engineering vibration 2019.07.25
7466 3D프린터의 사례, 문제점 및 향후 전망 2019.07.21
7465 증강현실의 기술 종류, 사례 및 전망 분석 2019.07.21
7464 핀테크의 출현배경, 문제점 및 활성화 방안 2019.07.18
7463 열역학8판 솔루션 2019.07.17
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7457 크리스퍼(CRISPR&CAS9) 유전자가위 2019.07.06
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» ①qPCR(Real time PCR) 실험 방법 및 실험 결과분석(Ct(=Cq)값으로 초기 DNA양 유추)&②ELISA종류와 원리 2019.07.06
7454 Real time PCR &RT-PCR 및 cDNA 합성&Melting curve analysis&RNA 추출법 2019.07.06
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